Resumen
Los compuestos de cromo son contaminantes ambientales debido a su uso en diferentes actividades industriales; el cromo hexavalente [Cr(VI)], en la forma de cromato y dicromato, es altamente tóxico y genotóxico para distintas formas de vida, habiéndose descrito que esto es debido a que produce estrés oxidativo en las células. Dado que se ha propuesto que el manitol funciona como amortiguador de especies reactivas de oxígeno y como fuente de poder reductor en las células y que se ha reportado que en A. niger la producción de manitol ocurre por la acción de la enzima manitol 1-fosfato deshidrogenasa, codificada por el gen m1pd, en el presente proyecto se realizaron experimentos para obtener una construcción molecular para realizar la interrupción del gen m1pd en la cepa ambiental Ed8 de A. tubingensis. Para ello, se utilizó la estregia de “Split Marker” (marcador interrumpido) que se basa en el PCR de fusión, mediante la cual se generaron dos fragmentos de aproximadamente 1.5 kb del gen m1pd (fragmentos 5’ y 3’) fusionados cada uno a un fragmento que corresponde a aproximadamente 3/4 partes del casete de resistencia a higromicina (HygR). Los fragmentos generados se denominaron 5MH y 3MH.Citas
Liu, K. y Shi, X. (2001). In vivo reduction of chromium (VI) and its related free radical generation. Molecular and Cellular Biochemistry, 222:41-47. [Cervantes, C., Campos-García, J., Devars, S., Gutiérrez-Corona, F., Loza-Tavera, H., Torres-Guzman, J.C., Moreno-Sánchez, R. (2001).Interactions of chromium with microorganisms and plants. FEMS microbiology reviews, 25(3), 335-347. Acevedo-Aguilar, F.J., Espino-Saldaña, A.E., Leon-Rodriguez. I.L., Rivera-Cano, M.E., Avila-Rodriguez, M., Wrobel, K., Wrobel, K., Lappe, P., Ulloa, M. y Gutierrez-Corona, J.F. (2006).Hexavalent chromium removal in vitro and from industrial wastes using chromate-resistant strains of filamentous fungi indigenous from contaminated wastes. Canadian Journal of Microbiology, 52: 809-815 Acevedo-Aguilar F.J. (2008). Desarrollo y aplicación de diferentes metodologías analíticas para el estudio del proceso de reducción de Cr(VI) por la cepa Ed8 (Aspergillus níger sp.) Tesis de Maestría, Posgrado en Química.Universidad de Guanajuato [5] Ruijter, G.J.G., Bax, M., Patel, H., Flitter, S.J., Vondervoort, P.J.I. van de, Vries, R.P. de, Kuyk, P.A. van y Visser, J. (2003). Mannitol is required for stress tolerance in Aspergillus niger conidiospores. Eukaryotic Cell, 2: 690-698. Rodríguez Carrillo, P.L., Gutiérrez Corona, J.F., López Torres, A. (2005). Secuenciación y estudio de expresión por RT- PCR del gen M1PD de la cepa resistente a cromato Ed8 de Aspergillus niger. 14o Verano de la Investigación Científica. Aljabani, S.M., and Martinez, I. (1997).Universal and rapid salt extraction of high quality genomic DNA for PCR-based techniques. Nucleic Acids Research, 25: 4692–4693. Wirsel S., Turgeon B.G., Yoder O.C. (1996). Deletion of the Cochliobolus heterostrophus mating-type (MAT) locus promotes the function of MAT transgenes. Curr. Genet, 29: 241-249.
Esta obra está bajo una Licencia Creative Commons Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional.