Identificación de β-actina y del marcador de inflamación NF-κB p65 en hígado, riñón y tejido adiposo de ratones con síndrome metabólico inducido, un estudio piloto

Resumen

El factor de transcripción NF-kB ha sido implicado en el desarrollo de enfermedades metabólicas debido a su papel en la regulación de las respuestas inflamatorias. Se ha estudiado en relación con estas enfermedades y ha abierto nuevas perspectivas para enfoques terapéuticos en su tratamiento. Además, también se menciona el uso de plantas en la investigación para desarrollar nuevas estrategias de tratamiento para estos trastornos metabólicos. Amphipterygium adstringens, conocido popularmente como cuachalalate, palo de rosa, cuachalalá, maxiterán y volador, es un árbol endémico de México que se encuentra en varios estados de la república y ha despertado gran interés científico debido a las diversas propiedades farmacológicas que se le atribuyen, como ser anticancerígeno, antiinflamatorio, gastroprotector, antimicrobiano y cicatrizante. El objetivo de este trabajo fue estandarizar un método para la detección molecular por Western Blot de la subunidad p65 de NFkB en tejido adiposo, riñón e hígado proveniente de ratones usados como modelo de síndrome metabólico. Los tejidos de hígado, riñón y tejido adiposo provenientes de ratones tratados con un extracto de Amphipterygium adstringens y una dieta rica en grasa durante 14 semanas, se sometieron a la homogenización (lisis) para extraer y cuantificar las proteínas. SDS-PAGE, electrotransferencia y Western Blot se usaron para la detección molecular por anticuerpos dirigido a p65 y β-actina. En este estudio, se obtuvieron con éxito y buen rendimiento y de forma íntegra las proteínas extraídas de los tejidos de hígado, riñón y tejido adiposo. Las muestras proteicas de tejidos fueron transferidas a membranas donde se detectó señal de la expresión de β-actina en los tres tejidos con las concentraciones de anticuerpos de 1:6000 y 1:1000. Mientras que la subunidad p65 fue únicamente detectada en tejido de hígado usando la concentración de anticuerpo a 1:500. Mediante la extracción de proteínas de tejido adiposo, hígado y riñón, se estableció las condiciones iniciales de concentración de proteínas y anticuerpos para detectar β-actina, p65 y otros futuros marcadores.